- Bleu de trypan
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Bleu de trypan 
Général Nom IUPAC 3,3'-[(3,3'-diméthyl[1,1'-biphényl]-4,4'-diyl)bis(azo)]bis[5-amino-4-hydroxynaphtalène-2,7-disulfonate] de tétrasodium Synonymes C.I. 23850
C.I. Direct Blue 14No CAS No EINECS PubChem SMILES InChI Propriétés chimiques Formule brute C34H28N6Na4O14S4 [Isomères] Masse molaire[1] 964,837 ± 0,055 g·mol-1
C 42,32 %, H 2,93 %, N 8,71 %, Na 9,53 %, O 23,22 %, S 13,29 %,Propriétés physiques T° fusion > 300 °C[2] Précautions Directive 67/548/EEC 
TPhrases R : 45, Phrases S : 45, 53, Écotoxicologie DL50 328 mg·kg-1 (souris, i.v.)[3]
267 mg·kg-1 (souris, s.c.)[4]LogP -0,120[2] Unités du SI & CNTP, sauf indication contraire.
Le bleu de trypan est un colorant vital utilisé pour colorer sélectivement les tissus ou cellules morts. C'est un colorant azoïque.Le bleu de trypan est aussi connu sous le nom de bleu diamine et de bleu Niagara.
Sommaire
Chimie
Le bleu de trypan est dérivé de la ditoluidine (C14H16N2). Le bleu de trypan est ainsi nommé car il tue les trypanosomes, parasites entre autres responsables de la maladie du sommeil. Un analogue du bleu de trypan, la suramine est utilisé en pharmacie contre la trypanosomiase.
Le rouge de trypan et le bleu de trypan furent synthétisés la première fois par la chimiste allemand Paul Ehrlich en 1904.
Coloration au bleu de trypan
Principe
La coloration au bleu de trypan est une méthode de coloration des cellules mortes. Elle utilise le bleu de trypan qui a tendance à entrer dans les cellules qu'il rencontre. Une fois dans la cellule, la molécule en question entraîne un mécanisme d’exclusion qui va éjecter cette molécule dans le milieu extérieur. Ce mécanisme nécessitant de l’énergie, seules les cellules possédant une source d’ATP peuvent le mettre en place. Ainsi, une cellule vivante expulsera la molécule et restera blanche au microscope, au contraire une cellule morte n’aura pas les moyens de la rejeter et deviendra bleue.
Une autre explication réside dans le fait que chez une cellule vivante, la membrane intacte empêche l'entrée de la coloration dans le cytoplasme, alors qu'au contraire chez une cellule morte, la membrane lésée laisse passer le colorant ce qui aboutit à la coloration de la cellule en bleu.
Cependant, cette molécule étant toxique, elle finit par tuer les cellules qui deviennent alors toutes bleues.
Utilisation
Observation au microscope optique de Hyaloperonospora parasitica dans une feuille d'Arabidopsis thaliana en utilisant une coloration au bleu de trypan.
Cette méthode est couramment utilisée lors de numération cellulaire. On utilise alors un hémacytomètre afin de compter les cellules dans un volume précis.
On peut également utiliser cette coloration pour visualiser les cellules mortes et les hyphes de champignon et Stramenopiles.
Cette méthode ne permet pas de distinguer les cellules mortes par apoptose des cellules nécrosées.
Notes et références
- Masse molaire calculée d’après Atomic weights of the elements 2007 sur www.chem.qmul.ac.uk.
- (en) « Bleu de trypan » sur NIST/WebBook, consulté le 12/05/2010
- Toxicology and Applied Pharmacology. Vol. 23, Pg. 537, 1972. PMID
- Naunyn-Schmiedebergs Archiv fuer Pharmakologie. Vol. 267, Pg. 31, 1970. PMID
Source
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