Dosage Du Glucose Par Le DNS

Dosage Du Glucose Par Le DNS

Dosage du glucose par le DNS

Le dosage du glucose par le DNS est un dosage colorimétrique du glucose.

Sommaire

Principe

On utilise les propriétés réductrices du glucose. À chaud et en milieu alcalin, il y a réduction de l'acide 3,5-dinitrosalycilique : DNS (acide 2-hydroxy-3,5-dinitrobenzoïque) qui joue le rôle d'oxydant, le glucose étant le réducteur.

  • Réaction de réduction de l'acide 3,5-dinitrosalicylique en acide 3-amino-2-hydroxy-5-nitrobenzoïque (3-amino-5-nitrosalicylique) :
Réduction dns.png
  • Le glucose, quant à lui est oxydé en divers produits d'oxydation :

Glc \longrightarrow produits \, d'oxydation + ne^{-}

L'acide 3-amino-5-nitrosalicylique est un composé rouge. Cette réaction n'est pas stœchiométrique : il n'y a pas de bilan d'oxydoréduction. L'intensité de la coloration rouge est proportionnelle à la concentration de l'ose si l'on opère dans des conditions physico-chimiques constantes. Les droites d'étalonnage ne passent pas toujours par l'origine.

Cette méthode n'est pas applicable au dosage d'un mélange complexe de glucides réducteurs.

Protocole

matériel

Solutions

  • DNS;
  • Solution de glucose à 0,005 mol/L ;
  • Eau distillée ;
  • Solution à doser.

Étapes

Préparation de la gamme d'étalonnage

Dans une série de tubes :

    • introduire 0-0,2-0,4-0,6-0,9-1,2 mL de solution de glucose à 0.005 mol/L
    • Ajuster chaque tube à 2,5 mL avec de l'eau distillée
    • Ajouter 1mL de réactif 3-5 DNS

Mélanger et boucher les tubes avec du coton cardé et du papier aluminium. Porter au bain marie à 100°C pendant 5 minutes exactement. Refroidir et ajouter 7,5 mL (Qsp 10ml) d'eau distillée dans chaque tube, homogénéiser et laisser reposer pendant 15 minutes. Lires les absorbances à 540 nm contre le témoin.

Essais

Ils sont à traiter dans les mêmes conditions opératoires.
Réaliser le dosage avec des prises d'essais de 0,5 ml diluées convenablement additionnées d'1ml d'eau distilée et d'1ml de DNS.

Tableau colorimétrique ( résultats expérimentaux )
Tubes 0 1 2 3 4 5
Solution de glucose à 0,005 mol/L en mL 0 0,2 0,4 0,6 0,9 1,2
Eau en mL 1,5 1,3 1,1 0,9 0,6 0,3
DNS en mL 1 1 1 1 1 1
Quantité de glucose en M 0 0,002 0,004 0,006 0,009 0,012

Ce tableau représente ce qui doit être mis dans chaque tube et en quelle quantité.

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Contenu soumis à la licence CC-BY-SA. Source : Article Dosage Du Glucose Par Le DNS de Wikipédia en français (auteurs)

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