- ADH (milieu)
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Milieu de Moeller
Le milieu de Moeller est un milieu de culture permettant la recherche de 3 enzymes :
- l'ornithine décarboxylase s'il contient de l'ornithine ;
- la lysine décarboxylase s'il contient de la lysine ;
- l'arginine dihydrolase s'il contient de l'arginine.
Sommaire
Composition
- Extrait de levure : 3 g
- L-ornithine (monochlorhydrate)
- L-arginine (monochlorhydrate) : 5 g (suivant le cas)
- L-lysine (monochlorhydrate)
- Glucose : 1 g
- Bromocrésol pourpre : 0,16 mg
- Éthanol : 1 mL
- Chlorure de sodium : 5 g
pH = 6,8
Ce milieu est présenté en petits tubes fins ce qui favorise l'anaérobiose.
Remarque : l'extrait de levure contient peut de protides, beaucoup de glucides et de facteurs de croissance en particulier le pyridoxal, coenzyme des décarboxylases. Le chlorure de sodium a été ajouté pour permettre la culture des bactéries halophiles.
Ensemencement
Ensemencer le milieu avec une suspension épaisse. Recouvir de paraffine (anaérobiose). Incuber 24 h à 37 °C.
Lecture et interprétation
Le milieu est pourpre (bromocrésol pourpre) avant l'ensemensement.
Premier temps : utilisation du glucose
Le glucose est utilisé par fermentation (favorisée par l'anaérobiose) ce qui provoque l'acidification du milieu d'où le passage au jaune du milieu.
Second temps : utilisation de l'acide aminé
Si elle en est capable, la bactérie utilise l'acide aminé avec production d'amines (voir les articles à propos des enzymes correspondantes) responsables de la neutralisation des acides produits lors de la première étape et de l'alcalinisation d'où le passage au violet du milieu.
Si elle n'est pas capable d'utiliser l'acide aminé, il n'y a pas production d'amines, les acides ne sont pas neutralisés et le milieu reste jaune.
Remarque : en cas de milieu violet, s'assurer de la présence d'un trouble témoignant de la croissance bactérienne. De plus, s'assurer que la bactérie est bien capable de fermenter le glucose.
Voir aussi
Articles connexes
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Catégorie : Milieu de culture
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