Redistribution de fluorescence après photoblanchiment

Redistribution de fluorescence après photoblanchiment

La redistribution de fluorescence après photoblanchiment (FRAP, fluorescence recovery after photobleaching) est une méthode utilisée en microscopie à fluorescence pour mesurer la vitesse de diffusion moléculaire. Elle peut être appliquée pour étudier la mobilité moléculaire dans des cellules vivantes.

Principe

Principe de la méthode FRAP

Lorsque l'on a une distribution homogène d'une population moléculaire fluorescente, on peut inhiber de manière irréversible sa fluorescence dans une zone restreinte de l'échantillon par photoblanchiment à l'aide d'un flash lumineux obtenu en exposant très brièvement cette zone avec un laser. On crée ainsi deux populations de molécules (une fluorescente l'autre pas) spatialement distinctes. Si les molécules sont capables de se déplacer dans le milieu, on assiste à une redistribution des deux populations entre la zone blanchie et le milieu adjacent jusqu'à l'homogénéisation des populations : la zone blanchie -- ou bleachée -- redevient progressivement fluorescente. L'analyse de la cinétique de récupération de fluorescence permet de déduire le coefficient de diffusion latérale « D », caractéristique de la vitesse de déplacement des molécules dans le milieu (plus la vitesse de diffusion est élevée plus la fluorescence ré-augmente rapidement).


Le FLIP (fluorescence loss induced by photobleaching) est une autre manière d'étudier la mobilité moléculaire. Dans ce cas on réalise des bleaching répétitifs sur une zone ou sur un point, jusqu'à ce que la fluorescence ait entièrement disparu ou ne varie plus. Le FLIP permet de mettre en évidence des continuités dans les structures cellulaires.

Ces deux méthodes sont généralement réalisées en microscopie confocale ou en Microscopie de fluorescence par excitation multiphotonique.

Applications

  • Mobilité moléculaire dans les membranes ou dans la cellule.
  • Proportion de molécules liées et donc immobiles.
  • Echanges entre compartiments cellulaires (ex : noyau/cytoplasme).
  • Echanges entre cellules (ex : par l'intermédiaire de jonctions communicantes).

Remarques

FRAP est également quelquefois traduit par "Récupération de Fluorescence Après Photoblanchiment" ou encore par "Recouvrement de Fluorescence Après Photoblanchiment".


Wikimedia Foundation. 2010.

Contenu soumis à la licence CC-BY-SA. Source : Article Redistribution de fluorescence après photoblanchiment de Wikipédia en français (auteurs)

Игры ⚽ Поможем написать курсовую

Regardez d'autres dictionnaires:

  • Redistribution de fluorescence apres photoblanchiment — Redistribution de fluorescence après photoblanchiment Sommaire 1 Définition 2 Principe 3 Applications 4 Remarques // …   Wikipédia en Français

  • Redistribution de Fluorescence Après Photoblanchiment (FRAP) — Redistribution de fluorescence après photoblanchiment Sommaire 1 Définition 2 Principe 3 Applications 4 Remarques // …   Wikipédia en Français

  • Fluorescence — La fluorescence est une émission lumineuse provoquée par l excitation d une molécule (généralement par absorption d un photon) immédiatement suivie d une émission spontanée. Ce processus est différent de la phosphorescence. La fluorescence peut… …   Wikipédia en Français

  • Photoblanchiment — Le photoblanchiment est la perte de fluorescence d une molécule. Une molécule fluorescente à l état excitée peut soit émettre un photon, soit être engagée dans une réaction photochimique qui va empêcher son retour à un état excitable. Il peut s… …   Wikipédia en Français

  • Fluorescent — Fluorescence La fluorescence est une émission lumineuse provoquée par diverses formes d excitation autres que la chaleur (on parle parfois de « lumière froide »). Elle se distingue de la phosphorescence en ce que la production de… …   Wikipédia en Français

  • Transfert d'énergie entre molécules fluorescentes — Pour les articles homonymes, voir Fret (homonymie). Le transfert d énergie entre molécules fluorescentes ou transfert d énergie par résonance de type Förster (FRET, acronyme de l anglais Förster resonance energy transfer), bien qu’observé par… …   Wikipédia en Français

  • FRET — Transfert d énergie entre molécules fluorescentes Pour les articles homonymes, voir Fret (homonymie). Sommaire 1 Introduction 2 Conditions du transfert d’énergie …   Wikipédia en Français

  • FRET (Physique) — Transfert d énergie entre molécules fluorescentes Pour les articles homonymes, voir Fret (homonymie). Sommaire 1 Introduction 2 Conditions du transfert d’énergie …   Wikipédia en Français

  • Transfert d'energie entre molecules fluorescentes — Transfert d énergie entre molécules fluorescentes Pour les articles homonymes, voir Fret (homonymie). Sommaire 1 Introduction 2 Conditions du transfert d’énergie …   Wikipédia en Français

  • Liste de sigles de biologie cellulaire et moléculaire — Sommaire : Haut A B C D E F G H I J K L M N O P Q R S T U V W X Y Z A ACP : amplification en chaîne par polymérase (ou réaction en chaîne par polymérase), méthode de …   Wikipédia en Français

Share the article and excerpts

Direct link
… Do a right-click on the link above
and select “Copy Link”