Methode de biuret
- Methode de biuret
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Méthode de Biuret
La méthode de Biuret est une méthode chimique de dosage des protéines.
Principe
En milieu alcalin, les protéines qui possèdent au moins 4 liaisons peptidiques forment avec les ions cuivre (Cu2+) un complexe bleu-violet. Un dosage colorimétrique est donc possible à 540nm. Le réactif de coloration utilisé est le réactif de Gornall ; il est composé :
- de tartrate double de sodium et de potassium, qui « chelate » (piège) le ions Cu2+ et évite leur précipitation en milieu basique sous forme d'hydroxyde de cuivre Cu(OH)2 insoluble ;
Un temps de réaction d'environ 30 minutes à l'obscurité est nécessaire à l'obtention d'une coloration stable. La lecture étant spectrophotométrique, il faut cependant réaliser une gamme d'étalonnage ainsi que des témoins de compensations adaptés.
Intérêts
- Cette méthode permet d'obtenir un dosage rapide des protéines. Contrairement à la méthode de Kjeldahl (qui reste une méthode de référence légale), les protéines sont dosées sans minéralisation. La technique est donc plus facile à mettre en place et aussi moins onéreuse.
- Le dosage des protéines est envisagé dans le lait, la quantité de protéines est une des qualités permettant de fixer le prix d'achat au producteur.
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Catégorie : Réaction chimique
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