Microscope de fluorescence par réflexion interne totale

Microscope de fluorescence par réflexion interne totale

Microscope de fluorescence par réflexion totale interne

Icône d'homonymie Pour les articles homonymes?, voir Microscope.
Principe du TIRFM.
1. Échantillon.
2. Zone d'onde évanescente.
3. Lame porte-objet.
4. Huile d'immersion.
5. Objectif.
6. Faisceau d'émission (signal).
7. Faisceau d'excitation.

Le microscope de fluorescence par réflexion totale interne, ou TIRFM pour Total Internal Reflection Fluorescence Microscopy, est un type particulier de microscope optique à fluorescence permettant d'examiner une tranche très fine d'un échantillon (moins de 200 nm d'épaisseur), grâce à un mode d'illumination particulier : la réflexion totale interne.

En biologie cellulaire, un grand nombre d'évènements moléculaires intervenant à la surface des cellules comme par exemple l'adhésion cellulaire, la fixation d'hormones sur des récepteurs de la membrane plasmique, la sécrétion de neurotransmetteurs ainsi que la dynamique membranaire (endocytose, exocytose) ont été étudiés en microscopie de fluorescence conventionnelle ou confocale. Cependant, il existe un état d'équilibre entre les molécules fluorescentes qui se lient à la surface du spécimen et celles présentes dans son environnement immédiat. Lorsque ces molécules sont excitées et leur fluorescence détectée par un microscope conventionnel, la fluorescence provenant des molécules liées est mélangée avec la fluorescence provenant des molécules libres qui sont généralement largement excédentaires.

La microscopie de fluorescence par réflexion totale interne permet de surmonter ce problème. Le principe de cet appareil est de n'exciter la fluorescence que sur une très faible profondeur, immédiatement adjacente à l'interface verre (support de l'échantillon)/eau (milieu environnant l'échantillon). L'excitation est due à une onde évanescente. Celle-ci est générée uniquement quand la lumière incidente est totalement réfléchie à l'interface verre / eau, ce qui ne se produit que pour un certain angle d'incidence : l'angle critique, c'est la réflexion totale interne. L'échantillon est alors soumis à un champ électromagnétique sur une faible profondeur au-delà de la surface(environ 200 nm). L'intensité d'excitation de la fluorescence décroît exponentiellement en fonction de la distance par rapport à la surface. On peut ainsi en TIRFM visualiser de manière très sélective les régions de contact de la cellule avec son support (membrane basale). Il est ainsi possible d'étudier avec une très grande résolution la morphologie ou les évènements intervenant à la membrane plasmique de cellules vivantes.

Notes et références


Bibliographie

Cette section est vide, pas assez détaillée ou incomplète. Votre aide est la bienvenue !

Liens externes

Sur les autres projets Wikimedia :

Microscopes
Microscopes optiques Microscope optique • Microscope optique à champ large • Microscope confocal (éventuellement à balayage laser) • Microscope à contraste de phase • Microscope de fluorescence par réflexion totale interne • Stéréomicroscope • Microscope 3D à déconvolution
Microscopes électroniques Microscope électronique • Microscope électronique en transmission (MET) • Microscope électronique à balayage (MEB) • Microscope électronique à balayage par transmission (MEBT) • Microscope électronique par réflexion
Autres microscopes « à sonde locale » Microscope à force atomique • Microscope optique en champ proche • Microscope à effet tunnel
Microscopes ioniques Spectrométrie de masse à ionisation secondaire (SIMS) • Sonde atomique tomographique • Sonde nucléaire (PIXE)
  • Portail de la physique Portail de la physique
Ce document provient de « Microscope de fluorescence par r%C3%A9flexion totale interne ».

Wikimedia Foundation. 2010.

Contenu soumis à la licence CC-BY-SA. Source : Article Microscope de fluorescence par réflexion interne totale de Wikipédia en français (auteurs)

Игры ⚽ Поможем написать курсовую

Regardez d'autres dictionnaires:

  • Microscope De Fluorescence Par Réflexion Totale Interne — Pour les articles homonymes?, voir Microscope …   Wikipédia en Français

  • Microscope de fluorescence par reflexion totale interne — Microscope de fluorescence par réflexion totale interne Pour les articles homonymes?, voir Microscope …   Wikipédia en Français

  • Microscope de fluorescence par réflexion totale interne — Pour les articles homonymes, voir Microscope (homonymie) et Microscopie. Principe du microscope TIRF 1. Échantillon. 2. Zone d onde évanescente. 3. Lame porte objet. 4. Huile d immersion …   Wikipédia en Français

  • Microscope a fluorescence — Microscopie à fluorescence La microscopie en fluorescence est une technique de microscopie optique qui tire profit du phénomène de fluorescence pour observer divers composés. Elle fait désormais partie des méthodes de recherche classiques en… …   Wikipédia en Français

  • Microscope À Fluorescence — Microscopie à fluorescence La microscopie en fluorescence est une technique de microscopie optique qui tire profit du phénomène de fluorescence pour observer divers composés. Elle fait désormais partie des méthodes de recherche classiques en… …   Wikipédia en Français

  • Microscope à fluorescence — Microscopie à fluorescence La microscopie en fluorescence est une technique de microscopie optique qui tire profit du phénomène de fluorescence pour observer divers composés. Elle fait désormais partie des méthodes de recherche classiques en… …   Wikipédia en Français

  • Microscopie de fluorescence par excitation multiphotonique — Microscope confocal Pour les articles homonymes, voir Microscope. Un microscope confocal est un microscope optique qui a la propriété de réaliser des images de très faible profondeur de champ (environ 400 nm) appelées « sections… …   Wikipédia en Français

  • Microscope Confocal — Pour les articles homonymes, voir Microscope. Un microscope confocal est un microscope optique qui a la propriété de réaliser des images de très faible profondeur de champ (environ 400 nm) appelées « sections optiques ». En… …   Wikipédia en Français

  • Microscope Confocal À Balayage Laser — Microscope confocal Pour les articles homonymes, voir Microscope. Un microscope confocal est un microscope optique qui a la propriété de réaliser des images de très faible profondeur de champ (environ 400 nm) appelées « sections… …   Wikipédia en Français

  • Microscope confocal a balayage laser — Microscope confocal Pour les articles homonymes, voir Microscope. Un microscope confocal est un microscope optique qui a la propriété de réaliser des images de très faible profondeur de champ (environ 400 nm) appelées « sections… …   Wikipédia en Français

Share the article and excerpts

Direct link
… Do a right-click on the link above
and select “Copy Link”