Uree-tryptophane

Uree-tryptophane

Urée-tryptophane

Le milieu Urée-tryptophane, improprement appelé urée-indole est un milieu de culture synthétique utilisé en bactériologie permettant la mise en évidence simultanée :

Sommaire

Composition

- L-tryptophane ...............................  3 g
- Urée ........................................ 20 g
- Monophydrogénophosphate de potassium ........  1 g
- Dihydrogénophosphate de potassium ...........  1 g
- Chlorure de sodium ..........................  5 g
- Éthanol à 95 °GL ............................ 10 ml
- Rouge de phénol ............................. 25 mg
- Eau distillée (qsp) .........................  1 l

Préparation

resultats possibles

à stériliser par filtration (utiliser de l'eau stérile pour limiter la contamination initiale).

Lecture

  • A uréase -
  • B uréase +
  • C indole +
  • D indole -
  • E TDA +
  • milieu rouge (basique) : uréase +
  • milieu orange ou jaune : uréase -
  • après addition de réactif de Kovacs : anneau rouge (indole +), anneau jaune (indole -)
  • après addition de chlorure de fer III : marron (TDA +), jaune (TDA -)

Production d'indole

La réaction d'hydrolyse du tryptophane, catalysée par la tryptophanase, produit de l'indole, de l'acide pyruvique et de l'ammoniac selon l'équation suivante :

Tryptophanase.png

L'indole produit est mis en évidence par le réactif de Kovacs. Le diméthylamino-4-benzaldéhyde réagit avec l'indole avec formation d'un composé rouge.

Hydrolyse de l'urée

Elle est catalysée par l'uréase, il y a production de dioxyde de carbone et d'ammoniac. Ce dernier alcalinise le milieu. Cette alcalinisation du milieu est mise en évidence par le virage du rouge de phénol au rose.

H_{2}N - CO - NH_{2} + H_{2}O \longrightarrow  \vec{CO_{2}} + \vec2{NH_{3}}

Désaminsation du tryptophane

Consulter l'article à propos de la tryptophane désaminase.

L'acide indole-pyruvique est mis en évidence par sa complexation en un composé marron foncé en présence d'ions fer III (ferriques, Fe3 + ).

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